农村大叔自制平菇菌种，蘑菇的菌种是怎样制作的？，自制平菇菌种全过程

二，栽培平菇之平菇菌种制备技术

目前大面积栽培的平菇品种有糙皮侧耳菇、漏斗状侧耳菇、金顶侧耳菇、长柄侧耳菇和小平菇等。

平菇按对温度的适应情况可分为低温型、中温型、高温型和广温型4种。低温型：适宜出菇温度5~20℃，这类品种菇质细嫩，味道鲜美，品质优良，但产量相对较低，一般生物学效率100%左右，主要品种有831、539、841、棕顶81等。中温型：这类品种适宜出菇温度10~25℃，生产性状优良，适应性强，产量较高，生物学效率一般在150%左右，主要品种有佛罗里达、苏平1号、新平1012、R378等。高温型：出菇温度在10~30℃，气温25℃以上仍能正常出菇，产量较高，质量较差，生物学效率一般在100%~140%，主要品种有P01、558、红平菇、侧五等。广温型：出菇温度在5~28℃，适应性强，产量高，一般生物学效率120%~150%，主要品种有清丰1号、109、丰抗90、珞珈1号等。

平菇菌种是人工培育的供进一步繁殖用的纯菌丝，优质菌种遗传性状优异，生命力旺盛，适应性广，抗杂力强，产量高。平菇菌种分为三级，即母种、原种、栽培种。母种由平菇的子实体经组织分离或孢子分离培养而成，一般盛装在玻璃试管内；原种由母种转扩而成，容器一般选用标准菌种瓶、罐头瓶、葡萄糖瓶或其他瓶类，培养料有棉籽壳、麦粒、木屑、玉米粒等，1支母种可转接4~6瓶原种；栽培种由原种转扩而成，容器多为塑料袋，原料多为棉籽壳或木屑，1瓶原种可转接20~25袋栽培种。

平菇菌种容易老化，在生产上一定要把握好制种时间，制作母种一般在原种制作前10~12天进行，制作原种在栽培种制作前30天进行，栽培种应在生产前30~35天进行制作。

制种要选好地址，最好坐北朝南，冬暖夏凉，地势高燥.环境清洁、空气新鲜，交通方便，有水源、电源，平坦空旷，附近没有畜禽舍、粮库和饲料库.还要远离酿酒、造醋、酱园、制曲等食品工厂。房间设计要既能关闭，又能通风.光线充足。墙壁刷白灰，加防水涂料，各作业区和专用房室布局合理，便于流水作业和无菌操作。

母种生产首先要制备培养基，以马铃薯、葡萄糖配方（即PDA培养基）最常用，其制作方法是：选择优质马铃薯，去皮并挖去芽眼，切成薄片，称取200克，放在1000毫升烧杯中，补水到1000毫升，煮沸30分钟。用4层纱布过滤，取其汁液。

若汁液不足1000毫升，应加水补足。加入葡萄糖20克、琼脂20克，一边搅拌，一边加热。全部融化后再补水至1000毫升，用玻璃棒拌匀，加热保持热度。

将配制好的PDA培养基趁热（60℃左右）利用漏斗分装试管，每支试管装管长的1/4，培养液不可黏附管口内壁，如有黏附物必须指拭干净。取适量棉花做成较紧实的棉塞，塞入试管约2厘米，紧贴试管内壁，外留1厘米，松紧度以用手指提起棉塞不掉为宜，尔后将试管放入灭菌锅的铁丝筐内准备灭菌。

灭菌时要在装有培养基的试管上面盖上牛皮纸或聚丙烯塑料薄膜，包扎好，以防棉塞受潮。将试管培养基放入高压灭菌锅，要先排尽锅内的冷气，当锅内气压达到0.005兆帕时，排放冷气，待压力表降到0时，关闭排气阀，继续加温。

气压达到0.014兆帕时，保持恒压30分钟，停火降压至零时进行排气，打开锅，待培养基温度降到60℃左右时，取出摆成斜面。其制作方法是在工作台上放上数根薄木条，将热试管从灭菌锅内竖直取出，管口一端放在木条上，其倾斜度以管中液体斜面长度为试管长度的2/3或3/4为好，冷却后，就成为试管斜面培养基，也称母种培养基。

灭菌后要进行检查，随机抽取几支斜面试管培养基放在25℃恒温箱中空白增养5~7天后，检查斜面上有无细菌或霉菌菌斑。若发现有杂菌，说明灭菌不彻底不能使用，需重新配置灭菌。

制作母种常采用组织分离法：选产生商品性状好的幼嫩、新鲜、清洁、无病虫的平菇做种菇，采摘后及时放入灭过菌的纸袋中带回接种室(箱)进行消毒。先用75%的酒精消毒双手，工具及种菇表面，然后用手撕开子实体，在菌盖与菌柄交界处用刀划成一个“田”字形，用接种钩钩取来粒大小的菌肉，迅速移接入PDA培养基斜面，塞上棉塞，在25~28℃下培养。母种制作另一种方法是孢子分离法，要选择菇形商品性状好、外表清洁、无病虫、七八成熟的子实体，放入灭菌纸袋带回接种室（箱）。菌盖表面用无菌水冲洗数遍后，用滤纸吸干菌盖表面的水分，在接种箱内将菇柄切去，将种菇菌褶朝下，支撑置于培养皿内，12~24小时后就可在培养皿内看到一层白色的粉状孢子。

用接种环德取少许平菇孢子于无菌水中稀释，用无菌注射器吸取孢子液在每支试管斜面上滴上几滴、在适温下培养。孢子萌发后，挑取萌发早、长势好的菌落，进一步转管培养。

将分离选育出或引进的母种，再分别转接到新的试管斜面培养基上，从而繁殖成新菌丝的过程，称之为转管或传代。一般1支母种可转接30~40支。转接时要严格进行无菌操作，以防污染，为了保持其活力，防止菌种退化，一般不宜多次转管或传代。

用取得的母种扩接转管或纯化前，要对场所和用具进行灭菌和消毒。场所天菌和消毒的主要方法有紫外线辐射灭菌和化学药物甲醛熏蒸等。紫外线辐射灭菌：就是灭菌室或接种箱用黑窗帘或黑布遮光，每20立方米空间用1支30瓦紫外线灯照射2小时。

甲醛熏蒸灭菌：在培养皿或其他容器内，按每立方米房间10毫升甲醛加5克高锰酸钾的比例配对，关好门窗闷一夜或更长时间，任甲醛挥发，可达到较好的灭菌目的。熏蒸后室内可喷洒25%~28%的氨水，或放置部分碳酸氢铵，以驱除刺激鼻眼的甲醛气味。

常用的消毒和灭菌方法还有：①按每立方米15~20克的用量点燃硫磺熏蒸；②用70%~80%的酒精或3%~5%来苏儿或0.5%~1%高锰酸钾1：1000的水溶液消毒皮肤及用具；③0.5%~1%石炭酸水溶液喷雾处理无菌室（箱)，或3%~5%石炭酸水溶液浸泡器械；④0.02%多菌灵喷洒培养料或其他物体表面，也可将其拌在培养料中防止霉菌污染。

无菌室或接种箱消毒后即可进行母种转管扩种了。左手拿分离得到（或购买）的母种管和待接种的斜面试管，右手拿接种耙在酒精灯火焰上来回烧红，拔去菌种管的棉塞，将管口在火焰上烧一下，再把接种粑烧一下，迅速伸入母种试管，稍加冷却后，切取米粒大小菌丝块（一定要带培养基)，迅速放入待接种试管斜面中心位置，拿出接种粑后，再把管口灼烧一下，烤一下棉塞迅速塞上。

接种后的试管，放入培养箱或培养室进行恒温(24~26℃)培养。培养室要空气新鲜、环境干净、无光或弱光，空气相对湿度70%左右，试管上盖上纱布或薄棉毯，拉上窗帘，形成无光培养，一般经8~14天，菌丝就可长满试管斜面。

菌丝长满后的母种要及时取出使用或放置到3~5℃的冰箱中贮存。低温保藏法是最简便易行的保藏方法，每隔2~3个月转接1次。

下期分享原种及栽培原种的制备