寒潮来袭 有关流行性感冒这种难题要了解，这个暑热天气如何避免流行性感冒

干货 | 寒潮来袭，带您识破”流感君”

流行性感冒（简称流感）是一种由流感病毒（Influenza virus）引起的具有高度传染性的人畜共患急性呼吸道疾病。流感病毒主要通过呼吸道分泌物的空气气溶胶或与感染者及其物品的直接或间接接触来传播。感染者有咳嗽、发烧等症状，严重者甚至会死亡。流感在世界范围内广泛流行，给公共卫生和畜牧业发展带来了严重的危害。

流感病毒是流感的病原体，属于正黏病毒科（Orthomyxoviridae），其核酸由分节段的单股负链RNA构成。流感病毒呈球形，其直径为80～120 nm, 有囊膜。流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。

流感病毒基因组结构复杂、基因易发生突变和重配，在自然界中宿主分布广泛，这使得流感病毒成为人类健康的重大威胁。根据病毒内部蛋白抗原性不同，分为甲、乙、丙、丁四个亚型，绝大多数季节性流感均与甲、乙两种亚型有关。接下来将主要介绍这2种病毒。

01.甲型流感病毒（Influenza A virus，IAV）

IAV除季节性流行外，历史上几次大流行暴发在人群中造成了严重疾病负担。IAV宿主范围较广，易发生抗原性漂移和转换。IAV根据其血凝素 (hemagglutinin，HA)和神经氨酸酶(neuraminidase，NA) 抗原性的不同，可将HA 分为16个亚型(H1-H16)，NA分为9个亚型(N1-N9)，因此，流感病毒可由HA和NA的不同组合而形成多种亚型。

02.乙型流感病毒（Influenza B virus，IBV）

IBV是引发季节性流感的主要病原，与IAV宿主广泛不同，IBV主要感染人和少数哺乳动物，极少有禽类自然感染的报道。

IBV在基因结构和编码的蛋白上与IAV存在一定的差异，主要表现在:

① IBV的节段6为双顺反子结构，编码NA和NB两种蛋白，而IAV缺乏NB蛋白。

② 两种病毒的片段7均编码M1和M2( BM2) 两种蛋白，IBV为双顺反子结构，而IAV主要通过对转录的mRNA剪切获得。

③ IAV编码的PB1-F2蛋白及PA-X蛋白为其所独有，在IBV尚未发现相应的蛋白。

1. IAV持续流行在人、猪、狗、马、海洋哺乳动物、禽类等宿主中。

2. IBV几乎只感染人类，只有少数报告病例出现在海豹、马、狗和猪中。由于宿主的限制，它们很少与疾病大流行有关。

3. ICV主要感染儿童、猪、野狗和单峰骆驼。ICV相对较低的流行率和较轻的临床结果使其不被纳入常规病毒学筛查。

4. IDV是最近被归类为丁型流感病毒的一种新型流感病毒。已在全球的猪、牛和羊等几种动物中发现。

流感病毒侵袭的主要目标是呼吸道粘膜上皮细胞，偶有侵袭肠粘膜的病例会引起胃肠型流感。

病毒侵入体内后依靠血凝素吸附于宿主细胞表面，经过吞饮进入胞浆；进入胞浆之后病毒包膜与细胞膜融合释放出包含的ss-RNA；ss-RNA的八个节段在胞浆内编码RNA多聚酶、核蛋白、基质蛋白、膜蛋白、血凝素、神经氨酸酶、非结构蛋白等构件；基质蛋白、膜蛋白、血凝素、神经氨酸酶等编码蛋白在内质网或高尔基体上组装M蛋白和包膜；在细胞核内，病毒的遗传物质不断复制并与核蛋白、RNA多聚酶等组建病毒核心；最终病毒核心与膜上的M蛋白和包膜结合，经过出芽释放到细胞之外，复制的周期大约8个小时。

部分流感病毒致病力强，及时的检测显得尤为重要，接下来将介绍一些病毒检测的方法。

国内外诊断流感检测的几种成熟技术平台

分子生物学诊断技术在流感病毒检测中凭借高敏感性与特异性、耗时短、程序简便等特点，已成为病毒诊断和研究不可或缺的重要技术方法。

1.RT-PCR

RT-PCR是一种经典的检测流感病毒的技术，目前已取代病毒分离培养成为流感诊断的金标准。

2.实时荧光定量PCR （qPCR)

qPCR经常用于包括流感在内的各种病毒的检测和分型。该方法在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,包括SYBR Green法和TaqMan探针法。特别是探针技术的高特异性和光谱技术的敏感性以及定量的特点，具有直观，重复性好，特异性强，敏感性高和易操作等优点。

3.LAMP

LAMP是一种新颖的恒温核酸扩增方法，可用来检测SARS、腺病毒、鼻病毒等。其原理是针对靶基因个别区域设计4种特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温条件(65℃左右)保温几十分钟，即可完成核酸扩增反应。不需要模板的热变性、长时间温度循环、繁琐的电泳、紫外观察等过程，该方法敏感性与RT-PCR类似。

4.微阵列芯片技术

微阵列芯片是流感病毒检测和分型的有效工具。近几年，研究者越来越感兴趣于研究用纳米颗粒和银染来替代荧光染色以提高其灵敏度。这种方法成为流感季节性流行或大流行时的准确和快速诊断的新工具。

5.流感病毒免疫学检测技术

流感病毒抗原检测技术包括直接荧光抗体试验，灵敏度可达60％～80％；流感快速诊断检测，可在30 min内得到结果。流感病毒抗体检测技术包括胶体金快速免疫层析技术和病毒中和试验。

参考文献：

<1> Nogales A, Martínez-Sobrido L, Woelk C. Reverse Genetics Approaches for the Development of Influenza Vaccines International Journal of Molecular Sciences. 2016, 18(1).

<2> Asha K, Kumar B. Emerging Influenza D Virus Threat: What We Know so Far! Journal of Clinical Medicine. 2019, 8(2).

<3> Zhu W, Wang C, Wang B-Z. From Variation of Influenza Viral Proteins to Vaccine Development International Journal of Molecular Sciences. 2017, 18(7).

<4> 靳远. 甲型流感病毒重要亚型的进化研究. City: 中国人民解放军军事医学科学院, 2015.

<5> 王江, 徐轶, 陈俊峰, et al. 流感病毒实验室检测方法研究进展. 中华医院感染学杂志. 2020, 30(02): 308-312.. City: 中国人民解放军军事医学科学院, 2015.

<5> 王江, 徐轶, 陈俊峰, et al. 流感病毒实验室检测方法研究进展. 中华医院感染学杂志. 2020, 30(02): 308-312.